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这就是9.412分的PNAS文章里,机制研究的思路?你学废了么……

实验万事屋  · 公众号  · 科研  · 2021-05-04 09:20
昨天讲完了这篇PNAS的表型实验部分,那我们今天继续来讲这篇9.412分的文章:做完了表型实验,也就是将Beclin1和下游基因通过表型进行了关联后,接下去,就要做二者的机制研究了:和其他筛库不太一样,如果是过表达Beclin1后,做了二代测序或者芯片,那么过表达Beclin1后,筛选到的下游基因多半是表达产生变化的。而他们用的筛选方法是CRISPR筛库,前几期也讲过具体原理。CRISPR筛库其实是一种切断下游基因功能的筛库方法,所以在这里Beclin1的表达,并没有对筛选到的下游基因产生表达影响:表达如果没有影响的话,那就是对于下游基因的功能进行了阻碍?那么CDH1(E-Cadherin)等基因的功能是啥呢?上膜参与细胞粘附:于是他们就用免疫荧光实验,来确定了一下过表达 ………………………………

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