iNature在冷冻电子显微镜下处理样品制备过程中的界面效应仍然具有挑战性。2024年4月25日,清华大学周晓煜、欧阳证及王宏伟共同通讯在Nature Methods在线发表题为“Electrospray-assisted cryo-EM sample preparation to mitigate interfacial effects”的研究论文,该研究介绍ESI-cryoPrep,这是一种基于电喷雾电离的天然质谱样品制备方法,旨在缓解由界面大分子吸附引起的蛋白质变性或首选取向相关问题。通过对喷雾参数的微调,优化了蛋白质完整性保存,达到了分析目标大分子所需的冰厚。使用ESI-cryoPrep,制备了5种蛋白质的高质量冷冻标本,并获得了近原子分辨率的三维重建。研究结果表明,ESI-cryoPrep有效地将大分子限制在非晶冰薄层的中间,促进了无印迹玻璃样品的制备。这种保护机制的特点是带电液滴内不同大小的带电生物分子分布不均匀,从而防止目标生物分子在
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