Nature Communications||综述:突破PAM限制CRISPR-Cas核酸酶库

CRISPR-Cas核酸酶需要通过与目标靶点互补的sgRNA以及靶点两侧的短序列(PAM)来识别靶标基因进而进行切割。其中PAM序列的灵活性大大限制Cas核酸酶的可靶向范围。以常用具有很高的DNA裂解活性的SpCas9和SaCas9为例，它们所识别的PAM序列多含鸟嘌呤/胞嘧啶（G/C-rich），因此利用已报导的碱基编辑系统无法在腺嘌呤/胸腺嘧啶富集（A/T-rich）区域进行精准碱基编辑操作。特别是最常用的SpCas9酶，需要NGG PAM序列进行识别，以至于其作用限制仅为基因组的9.9％，靶向区域十分局限。近日，研究人员在Nature Communications杂志上发表了题为“CRISPR technologies and the search for the PAM-free nuclease”的综述文章，作者综述了目前为了扩大CRISPR工具的基因组靶向范围而产生的一些具有新颖PAM偏好的Cas9变 ………………………………