3分钟用BLAST设计qPCR 引物！但有个Bug你估计不知道……

BLAST一般来说，是给你们用来做序列比对的，当然，也能用Primer BLAST做简单的引物验证。所以Primer BLAST其实也能用来做引物设计，这个和Primer 3差不多好用吧。就直接把序列bia进去就行：调整一下所需要的产物片段大小，以及Primer的退火温度，就行了。至于跨内含子……实际上你如果只是bia一段序列的话，是无法选择引物跨内含子的。显示结果，就会展示出给你设计的引物位置：以及序列：当然，你也可以直接输入你需要扩增的片段的登录号，就像这样：由于使用的是片段登录号，所以对序列的注释（外显子位置，CDS等等）都会显示，所以，这里就能选择“跨外显子”设计引物了。为啥引物要跨外显子呢，因为怕qPCR的过程中，会引起DNA污染。一旦一条引物 ………………………………