这篇5.201分的SCI文章，用CRISPR来研究miRNA？怎么做到的的……

上次给你们讲了CRISPR在磷酸化研究上的应用，对于磷酸化位点的定点突变，可以模拟磷酸化及去磷酸化来进行验证。这次就继续给你们讲讲这篇5.201分的文章，来看看miRNA研究中的应用：其实这篇文章讲得并不复杂，大致的意思就是验证这个基因是miRNA的靶基因，通过筛选找到了对应3'UTR上的miRNA，然后先用Luciferase验证了一波：接着他们用CRISPR……来突变了基因的3'UTR上的MRE（miRNA Response Element , miRNA应答元件)：一般来说很多研究中并不会这么做，大部分人会去考虑用Sponge来消减掉miRNA，这里他们也用到了Sponge：但这里他们用了sgRNA对于定点的突变效率并不算特别高，通过深度测序，突变主要是在miRNA结合的MRE附近：当然，用CRISPR来突变掉MRE，其实要比直接用Sponge来消减掉miR ………………………………