CHOM | 刘雪等利用CRISPRi-seq研究病原菌致病机理和感染瓶颈

责编 | 兮毒力因子鉴定是病原菌致病机理研究的一个重要内容。目前广为应用的是转座子插入突变筛选（Tn-seq: Transposon insertion sequencing），然而这一技术手段有明显的局限性：不能研究必需基因（必需基因的插入突变是致死的）；并非所有的插入突变都能导致基因失活，因而要进行全基因组的研究需要过饱和的突变体库；技术上建库复杂，测序步骤繁琐，失败率高等。 病原菌致病机理研究中的另一个重要内容是感染过程中的瓶颈问题。细菌要成功侵染宿主需要一定的剂量，这是因为它们在侵染宿主的过程中需要突破一层层的屏障，在通过屏障时会不断有细菌被清除。这些屏障主要来自宿主方面的压力，比如营养限制，免疫响应等。就像攻城一样，单枪匹马无法成功 ………………………………