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揭秘蛋白纯化及制备过程中沉淀的形成

生物制药合伙人  · 公众号  ·  · 2023-01-09 12:57
蛋白发生沉淀的类型        蛋白质的水化膜遭到破坏或者中和了表面的净电荷后形成的沉淀往往是可逆的,这在蛋白盐析,蛋白等电沉淀中最为常见,利用这一特性也常用来分离纯化蛋白。这也可以理解为蛋白分子的物理状态发生了变化,这种聚集沉淀是可逆的。       蛋白分子在遭到剧烈的物理化学(如高温,极端pH等)作用时,分子中的次级键遭到破坏断裂,导致空间构象从紧密有序的变为松散无序的状态,这种清况下形成的沉淀是不可逆的,蛋白发生不可逆变性。这种沉淀也可以理解为蛋白分子发生了化学本质的变化。      对沉淀后的蛋白分子进行生物活性鉴定即可判断蛋白沉淀的类型,物理状态变化引起的沉淀具有原生物活性,化学本质变性引起的沉淀无原生物活性。更多时是先发生可逆的物理变性沉淀,物理变性沉淀积累到一定量导致发 ………………………………

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