“上期我们已经介绍了如何对测序下机数据进行拼接,过滤低质量,嵌合体,以及去接头等详细的操作步骤,基于上期质控后的clean序列,本期我们将介绍微生物分析流程的聚类OTU和物种注释模块。通常情况下,两端reads拼接后得到的序列数目远大于环境中物种数目,为了能够从各层级物种水平分析物种的种类和丰度,需要对序列进行聚类和注释。1数据及软件准备上期去除嵌合体后的序列seqs.nonchimeras.fna文件作为这里的输入文件,并重新命名为sample.fa;参考序列为Greengene的参考序列97_otus.fasta和物种分类注释97_otu_taxonomy.txt;安装Qiime软件;2操作步骤OTU聚类通过设定一个阈值,将相同或者相似的序列归为一个OTU;使用Qiime软件里的pick_otus.py,并选择默认算法uclust,相似
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