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Nat Methods | 西湖大学党波波博士等开发出蛋白质定点化学剪切方法以代替传统生物酶切

BioArt  · 公众号  · 生物  · 2019-03-26 00:22
责编丨迦溆蛋白质生物表达过程中,不同标签肽(如His-Tag、FLAG-Tag)、蛋白(如GST、MBP)往往需要被融合到目标蛋白的C端或N端以提高目标蛋白表达产率、可溶性,实现蛋白纯化。然而被融合的标签肽、蛋白最终往往需要从目标蛋白上切掉【1】。目前唯一的生物兼容性蛋白剪切方法是生物酶切,包括常用的TEV酶、thrombin酶等。然而,生物酶切经常面临许多问题:如生物酶的加入增加了后续再除去的纯化步骤;高价蛋白酶增加了大量制备目标蛋白的成本;另外很多情况下,特别对于膜蛋白,生物酶切效率往往很低【2】。蛋白质化学剪切方法因为操作方便,成本低等优势有望解决生物酶切涉及的各种问题。然而传统蛋白质化学剪切方法因为选择性差,反应条件苛刻,并没 ………………………………

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