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【分析】用DNA链提高核酸酶特异性

X-MOL资讯  · 公众号  ·  · 2021-05-20 19:29
注:文末有本文科研思路分析核酸酶是生物学、化学和医学研究中被广泛使用的工具。在实际应用的层面,目前对核酸酶的应用都是基于其可以预测的工作机制。然而,核酸酶容易受到体系中其他核酸链的干扰,其特异性并不稳定。这一现象往往导致意料之外的串扰,对核酸酶在各个领域的应用形成很大的限制。在酶-核酸探针检测体系,情况更为严重。在酶-核酸探针领域广泛使用的λ exonuclease (λ exo)、apurinic/apyrimidinic endonuclease-1 (APE-1)和Endo IV均易发生预料之外的非特异酶切现象,严重限制了酶-探针检测体系的实际应用。因为在酶-探针检测体系中,不与野生链结合的核酸探针以单链的形式大量存在。如果核酸酶切割单链核酸探针,荧光信号就会作为背景信号大量产生, ………………………………

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