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色谱柱选择指南-固定相的键合方式及修饰

药事纵横  · 公众号  ·  · 2023-01-18 06:00
了解固定相常见的键合方式及其修饰,有助于掌握各类型色谱柱的使用条件,提高方法开发效率。 制备反相色谱柱填料常用的方法是在有机硅烷和硅醇的硅胶颗粒表面上发生共价反应,来“键合”生成固定相或者配合基R:X3-Si-R+≡Si-OH→≡Si-O-Si(X2)-R+HX(硅烷)(硅烷醇)(最后的固定相)HPLC柱子的制备可通过几种不同的硅烷-硅胶反应来实现。单体相是反相柱子里使用最广泛的技术,即一个硅烷分子和硅醇基反应。这种一对一键合,使生成的键合相相对完善并且具有很好的重现性。这样制作的填料通常会具有最高的柱效,因为固定相层相对不拥挤,因此溶质分子能够快速扩散进出固定相。相反,多官能团的、高度聚合的固定相则表现出较低的溶质扩散速度和较低的柱效,尤其是在流动相流速较高的情况下。最初反相色谱填料的存在的主要问题 ………………………………

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