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为什么我的qPCR每次结果都不太一样?!

实验万事屋  · 公众号  · 科研  · 2018-09-12 08:42
qPCR是不是会做不好呢?即使是看了人家文献里的PCR方法,照搬了人家的引物,还是做得每次结果都不一样?其实具体原因有这么几个。第一点,你基本上不太会用移液枪。移液枪特别是微量移液枪,特别长期快速操作,也就是说弹簧没来得及恢复又进行下一步按压。极其容易导致……你的大拇指关节受损。好吧,这都是其次,关键是你的移液量可能都会有变化。所以,关爱拇指,吸取液体时,保持1-2秒,给弹簧一个缓冲。当然,在加模板的时候,提高模板加样量,也可以尽可能减少每次加样的误差。吸取液体的时候,需要把枪头插入凹液面底部,而不是插到凹液面的侧面。侧面比较容易产生气泡:当然,你会说,每次枪头都插很深(莫名其妙觉得是在开车),但是这 ………………………………

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