哺乳动物稳定细胞系和细胞池生产重组蛋白

摘要本文对近期涉及悬浮哺乳动物细胞生产重组蛋白的文献进行综述。我们介绍了两种构建稳定细胞系的方法，分别为使用转座子和慢病毒载体构建，产生非靶向外源基因整合；另一种方法是使用位点特异性重组酶，使外源基因靶向整合。传统构建细胞系的方法是通过非同源DNA末端连接的方法构建质粒后转染细胞，而本文介绍的方法所获得的细胞系，其蛋白质产量通常优于通过传统方法建立的细胞系。此外，这些技术还可以用于稳定细胞池的构建，以及通过基因转移和基因筛选的原理获得重组细胞的异源种群，而不需要做单克隆筛选。这些技术大大地缩短从转基因到获得蛋白质的时间。背景介绍当我们想用哺乳动物细胞生产重组蛋白用于结构学研究时，首先想到 ………………………………