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学会这个方法,5 分钟找到合适的 qPCR 引物

生物学霸  · 公众号  · 生物  · 2019-11-11 17:00
设计 qPCR 引物,一种方法就够了,省时省力,关键还靠谱!1. 首先还是打开 pubmed,选择 gene, 输入基因名 ATG7,点 search。 2. 选择正确的基因名和物种,记住基因名下面的那串数字,也就是 gene ID,也可以直接 copy 这串数字。 3. 打开 primer bank。网址是:https://pga.mgh.harvard.edu/primerbank/,在 search by 的地方选择 NCBIGene ID,Species 那里选择相应的物种,将上一步 copy 的数字放在 For text 里面,然后点 Submit。 4. 出来了,在 Gene Description 那里再对一下基因信息,确定是自己想找的基因后,在几对引物中选择自己看着顺眼的那对拿去合成就好了。开玩笑啦,还是有选择标准的:首先看看 Amplicon Size,也就是扩增长度,建议在 100~300bp 间比较好扩增;引物长度在 20~25bp 较好,而且上下游 ………………………………

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