专栏名称: 爱吃洋芋的酸菜鱼
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WB问与答 ‖ 一张膜要孵多个抗体,但期刊又要求整膜怎么办?

爱吃洋芋的酸菜鱼  · 公众号  ·  · 2024-09-25 21:42
    

主要观点总结

文章讨论了WB图像的要求及如何处理以满足期刊要求并减少损耗。提到的方法包括重新曝光和拼接、使用Strip液处理等。

关键观点总结

关键观点1: WB图像要求严格,需满足期刊对膜条完整性的要求。

许多期刊要求提供完整的膜条,对于多蛋白指标检测,这增加了实验难度和成本。

关键观点2: 重新曝光和拼接方法

对每张膜完整拍照,裁剪后拼接,以展示所有条带来自同一张膜。同时提交完整膜图像、拼接图像和显影条带原始图像作为补充材料。

关键观点3: 使用Strip液处理方法

在孵育第一个抗体后拍摄照片,使用strip液洗膜并重新孵育第二个抗体。同一张膜上检测多个蛋白,但需注意洗脱和重新孵育对蛋白完整性和信号强度的影响。

关键观点4: 选择合适的方法需要考虑实验要求、设备以及期刊指导原则。

在实施任何方法前,建议阅读期刊的作者指南,并根据需要进行预实验以优化条件。


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