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在哺乳细胞中通过Cre-LoxP工具实现基因组工程

抗体圈  · 公众号  · 医学  · 2018-01-16 14:59
摘要背景：靶向核酸酶改变了基因组编辑技术，为哺乳动物基因组定向编辑提供了有效的方法。与此同时，对Cre-LoxP技术的需求不断增加，Cre-LoxP作用于复杂的基因操作如：多基因删除、增加，基因融合和一定条件下特定位点基因序列的移动。结果：我们分别使用两套高效病毒系统，整合慢病毒和非整合腺病毒结合病毒，设计并构建了两套Cre重组酶表达载体。我们揭示了Cre转入携带LoxP红色荧光蛋白和嘌呤霉素抗性报告基因的稳定重组HEK293细胞系的效率。转入的Cre重组酶能够有效地直接或在一定条件下剪切LoxP红色荧光蛋白和嘌呤霉素基因，由此证明了这些分子工具的功能。由于两个筛选标志物的方便使用，这些基于病毒的体系为更先进的基因编辑、复杂的基因组杂 ………………………………

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