主要观点总结
本文主要介绍了靶向蛋白降解剂（TPD）的相关内容，包括其瓶颈之一E3连接酶的发现和鉴别方法。文章提及了发现E3连接酶的两种策略、各种方法的优势与局限性，并进行了对比分析。
关键观点总结
关键观点1: 靶向蛋白降解剂（TPD）的作用机制
TPD通过诱导E3连接酶和目标兴趣蛋白（POI）结合，导致泛素化，进而使目标蛋白降解。
关键观点2: E3连接酶的瓶颈问题
当前面临的主要挑战是已开发的可用E3连接酶比较有限，且癌细胞可能产生耐药性。
关键观点3: 发现E3连接酶的两种策略
主要通过从E3连接酶到配体和从配体到E3连接酶两种策略来鉴别。从E3连接酶出发，采用合理的设计和化合物筛选；从配体出发，利用表型筛选或单价胶化学campaigns，通过靶标反褶积确定E3连接酶。
关键观点4: 遗传学方法
CRISPR筛选是识别药物或化合物蛋白靶点的有力工具，在TPD的E3连接酶的及其配体的发现中已有许多成功的案例。
关键观点5: 基于亲和力的蛋白质组学方法
利用协同免疫沉淀-质谱(co-IP-MS)和亲和纯化质谱(AP-MS)等方法鉴定TPD招募的E3连接酶。基于亲和的蛋白质组学方法已成功用于TPD的E3连接酶鉴定。
关键观点6: 化学蛋白质组学方法
如基于活性的蛋白分析(ABPP)、光亲和标记和酶介导的邻近标记等，已被用于鉴定TPD募集的E3连接酶。ABPP是一种强大的工具，可以全局搜索靶标及其反应位点。
关键观点7: 各种方法的优势和局限性
每种方法都有其独特的优势和局限性，应根据降解剂的性质和具体情况选择合适的方法。有时需要组合多个方法来反褶积E3连接酶。
文章预览
侃言 靶向蛋白降解剂（TPD） ，包括蛋白水解靶向嵌合体(PROTACs) 和分子胶降解剂（MGDs)，用来降解靶标蛋白，是开发癌症及其它复杂疾病新型疗法的一种新兴策略。 主要作用机制 是通过靶向降解剂邻近诱导E3连接酶和目标兴趣蛋白（POI），进而导致泛素化，以及随后使目标兴趣蛋白降解。 其中，对于可用来发挥降解蛋白作用的 E3连接酶 相对比较匮乏。相关发现主要依赖于表型筛选或偶然发现，需要系统地靶点反褶积。 本周，药化顶刊 J Med Chem 刊载了一篇对E3连接酶反褶积发现方法最新的的总结和展望，一起来看看。 01 TPD瓶颈之一 E3连接酶 TPD在剂量、副作用、耐药性、和调节“难成药”靶标方面比传统的基于抑制剂的药物开发具有潜在的优势。如上图，TPD同时结合POI和E3连接酶，从而诱导POI泛素化。一旦泛素化，POI即会被引导至泛素蛋白酶
………………………………
