科研干货 | 常用蛋白酶详解，酶切条件！

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凝血酶（Thrombin） 切割位点：最佳切割位点是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2'，其中X4和X3是疏水氨基酸，X1'和X2'是非酸性氨基酸，例如L-V-P-R-G-S、L-V-P-R-G-F和M-Y-P-R-G-N等。在X4-X3-P-R-G-X2'之间切割比在X4-X3-P-K-L-X2'更有效。其他识别位点是X2-R[K]-X1'，其中X2或X1'是甘氨酸，例如A-R-G和G-K-A，切割发生在第二个残基后。 特点： 纯度高，不含其他蛋白酶活性；酶切活性高，能够有效切割质量比为1:1000的蛋白；切割可在20℃到37℃之间进行0.3到16小时； 有效的酶切缓冲液是20mM Tris-HCl缓冲液，含150mM氯化钠，pH 8.0。 应用：广泛用于基因工程产品的开发，作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂，尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。 凝血因子Xa 切割位点：识别序列通常为Ile-Glu-Gly-Arg↓，切割位点在精氨酸的羧基端。 特点： 具有较高的特 ………………………………