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实验科普|数字PCR(dPCR)是什么?(上):概念、发展历史、实验原理

实验老司机  · 公众号  ·  · 2024-12-14 07:00
    

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数字PCR(Digital PCR, 也可以称为dPCR)是一种核酸定量技术,能够在单分子水平上对DNA或RNA进行绝对定量。与传统的实时定量PCR(qPCR)相比,dPCR具有更高的灵敏度和准确性,因此在生物学研究和临床诊断中得到了广泛应用。本文将分成上下两篇,本篇将详细介绍数字PCR的概念、技术发展历史、实验原理。 数字PCR的概念 数字PCR是一种基于PCR的核酸定量技术,也就是本质上它还是PCR,但其反应的过程、数据分析的方法与普通的PCR却有很大区别。数字PCR通过将核酸原始样本分散成数千到数百万个独立的微反应单元,每个单元中的DNA模板可以是单个分子或根本没有DNA分子。然后这数千数万个独立的反应单元同时进行PCR扩增后,通过检测每个单元中的荧光信号来确定目标DNA分子的存在与否,从而实现对目标分子的绝对定量。 图片来源:https://images.app.goo.gl/kZgk ………………………………

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