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摘要 正文 在进行自噬研究时,提取蛋白进行 Western Blot 实验,检测 LC3-I 和 LC3-II 几乎是必做的实验,那么,进行 LC3 检测时,需要注意哪些要点呢?我们一一道来。 LC3: 从何处来?往何处去? LC3/Atg8 被具有蛋白内切酶活性的 Atg4 在羧基端剪切,生成胞质 LC3-I。LC3-I 通过 Atg7 和 Atg3(分别对应 E1 和 E2 样酶)参与的泛素样反应,使磷脂酰乙醇胺 (PtdEth,PE)偶联,生成脂质化形式的 LC3,也称作 LC3-II,它可以附着到自噬体(autophagosome)的膜上,是自噬体的结构蛋白。在降解过程中,位于自噬溶酶体外膜的 LC3-II 被半胱氨酸蛋白酶 Atg4B 移除后回收,位于内膜的 LC3-II 则与包裹的内容物一起,被溶酶体降解。 图 1:自噬信号通路的调控 LC3A/B/C 有种属细胞/组织分布特点 哺乳动
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