厦门大学刘亮教授课题组在Nature biotechnology期刊发文揭示CRISPR-Cas9系...

主要观点总结

刘亮教授课题组在Nature biotechnology发表了题为“Trans-nuclease activity of Cas9 activated by DNA or RNA target binding”的研究论文，揭示了Cas9的新核酸酶活性。研究内容包括Cas9反式切割活性的挖掘和应用、Cas9-sgRNA系统的研究和优化、晶体结构研究以及新检测工具的开发。该研究为基因编辑和分子诊断领域提供了新的视角和工具。

关键观点总结

关键观点1: Cas9新核酸酶活性的发现

刘亮教授课题组揭示了Cas9在特异性识别目标DNA或RNA分子后，对非目标核酸分子展现出高效的反式切割活性，这一发现为基因编辑工具的开发提供了新的基础。

关键观点2: Cas9-sgRNA系统的研究和优化

研究过程中，团队成员发现了target DNA激活了Cas9-sgRNA的反式切割活性，并采用Cas9-tracrRNA-crRNA系统对其反式切割活性进行检测，结果表明该系统在双引导RNA系统的协助下，反式切割活性得到了显著提升。

关键观点3: 晶体结构研究和检测工具的开发

团队成员进一步获得了Cas9-sgRNA-target RNA三元复合物的晶体结构，揭示了Cas9系统靶向目标RNA的原子基础。基于这一发现，刘亮团队结合核酸扩增技术开发了DACD和RACD两款核酸检测工具，实现了对猴痘病毒、呼吸道合胞病毒的高特异性、高灵敏度的快速检测。

关键观点4: 研究的重要性和影响

该研究证实了Cas9存在新的核酸酶活性，并拓展了其在基因编辑以外的应用，对基因编辑提供了一定的指导作用。同时，该研究推进了CRISPR检测在分子诊断领域的发展，得到了多项基金的支持。