详解三代测序龙头Pacbio的单分子荧光测序技术

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有观点，有态度 这是生命科学产业观察公众号的第 1037-3 期文章 来源：分子庄园 一、SMRT技术 SMRT，全称Single Molecular Real Time Sequencing，即单分子实时测序技术，是一项基于第二代SBS(边合成边测序)测序技术研发的第三代测序技术。 特点在于测序时不需要经过PCR扩增，即可实现对每一条DNA分子的单独测序。 1、SMRT Cell SMRT Cell，测序芯片，厚度100nm，一面带有15万个直径为几十纳米的纳米孔(ZMW)。一张芯片上的有效纳米孔能同时进行测序，一次可得几亿个碱基序列。 2、ZMW ZMW，全称Zero Mode Waveguide，零模波导孔。纳米孔底部具有特殊的光学设计，激发光在纳米孔中衰减极快，只有在距底部30nm范围内的dNTP才能被激光出荧光信号，从而降低了测序的荧光背景噪音，有效提高测序的准确度。 3、荧光标记 与illumina将荧光基团标记于碱基上不同，PacBio对dNTP的处理 ………………………………